目的：沉默葡萄糖转运蛋白-1（glucose transporter protein-l，Glut-1）的表达对食管鳞癌TE-13细胞增殖、周期及迁移的影响，并探究可能的作用机制。 方法：采用慢病毒感染的方法将特异性针对Glut-1基因的Glut-1-shRNA转入TE-13细胞，建立稳定干扰Glut-1表达的TE-13细胞株，分成Glut-1-shRNA组和阴性对照组进行对比研究。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Glut-1-shRNA对TE-13细胞Glut-1 mRNA及其蛋白表达的影响。CCK-8法、FCM法和Transwell小室迁移实验分别检测沉默Glut-1表达后对TE-13细胞增殖、细胞周期和迁移的影响；同时采用蛋白质印迹法检测细胞迁移以及乏氧相关蛋白的表达情况。 结果：采用慢病毒将Glut-1-shRNA转入TE-13细胞后，可明显下调Glut-1蛋白（t=6.713，P<0.01）和mRNA的表达水平（t=4.181，P<0.05）。与阴性对照组相比，Glut-1干扰后细胞的增殖至72小时（t=3.097，P<0.05）和96h（t=3.497，P<0.05）明显被抑制，同时细胞的迁移能力可见下降，但是细胞周期至24小时未见影响；基质金属蛋白酶的MMP-9（t=6.895，P<0.01）和缺氧诱导因子HIF-1α（t=13.74，P<0.001）的表达明显下调，但是MMP-2的表达没有变化（t=2.582，P>0.05）。 结论：沉默Glut-1的表达可抑制食管磷癌细胞株TE-13细胞的增殖和迁移，并明显下调细胞内MMP-9和HIF-1α蛋白的表达，为寻找靶向治疗食管癌新靶点提供了初步的实验基础。

目的 探讨肿瘤转移抑制候选基因（MTSS1）在胃癌组织中的表达水平及对胃癌细胞增殖凋亡的作用。方法 Western blot检测收集的胃癌组织及对应的癌旁组织中?MTSS1蛋白表达水平。通过细胞转染的方法将过表达载体pEGFP-N1-MTSS1、空载体pEGFP-N1 转染至胃癌细胞中，MTT检测48h的细胞增殖情况，流式细胞术检测48h的细胞凋亡情况，Western blot检测48h细胞中?Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平。胃癌细胞与NOTCH信号通路抑制剂S2188作用48h后，检测细胞凋亡及细胞中?Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平。结果 胃癌组织中MTSS1蛋白水平明显低于癌旁组织（P<0.01）。pEGFP-N1-MTSS1组细胞存活率明显低于pEGFP-N1组（P<0.01）。pEGFP-N1-MTSS1组细胞凋亡率明显高于pEGFP-N1组（P<0.01）。pEGFP-N1-MTSS1组细胞中Cleaved Caspase-3表达水平明显高于pEGFP-N1组（P<0.01）。pEGFP-N1-MTSS1组细胞中HES1、NICD1、NICD2表达水平明显低于pEGFP-N1组（P<0.01）。NOTCH信号通路抑制剂S2188作用后的胃癌细胞凋亡及蛋白表达趋势与pEGFP-N1-MTSS1组细胞相一致。结论 MTSS1在胃癌组织中表达下调。MTSS1能促进胃癌细胞凋亡，抑制胃癌细胞增殖，作用机制与NOTCH信号通路有关。

目的：应用RNA干扰技术（RNAi）沉默肺癌A549细胞中CXCR6基因的表达，探讨其对A549细胞增殖、体外侵袭力和裸鼠成瘤能力的影响。方法：MTT法和Transwell小室模型检测稳定沉默CXCR6基因的A549细胞增殖和细胞侵袭迁移能力。将稳定沉默CXCR6的A549细胞与对照细胞皮下接种裸鼠，观察接种后肿瘤生长情况。结果：稳定沉默CXCR6基因的A549细胞与正常A549细胞相比，前者增殖速率明显下降(P<0.01)，增殖平均抑制率为30.70%；前者的体外侵袭力也明显降低(P<0.01)，侵袭平均抑制率为74.93%，迁移平均抑制率为70.19%。裸鼠体内实验显示，稳定沉默CXCR6基因的A549细胞与正常A549细胞相比，其裸鼠体内成瘤能力降低(P<0.05)，瘤体重量下降了62.5%。结论：沉默CXCR6基因的表达，从而抑制A549细胞的增殖、体外侵袭力和抑制成瘤能力，CXCR6在肺癌的发生发展中发挥着重要作用。

目的 探讨 RNA 干扰细胞分裂周期蛋白 6（CDC6）基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移

的影响及其作用机制。方法 采用蛋白质印迹法（Western blot）检测永生化结直肠细胞株（FHC）、结直肠癌细胞

株（SW620、LOVO、HT29）中 CDC6 蛋白的表达情况。利用 Lipofectamine 2000 将 CDC6 siRNA 转染至 SW620 细 胞，以转染si-con的SW620细胞作为阴性对照，采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋

亡情况，Transwell 小室实验检测细胞侵袭和迁移情况。采用 Western blot 检测 Janus 激酶 2（JAK2）、磷酸化-JAK2 （p-JAK2）、信号转导及转录激活因子 3（STAT3）及磷酸化-STAT3（p-STAT3）蛋白的表达情况。采用 JAK2/STAT3

信号通路激活剂 colivelin 处理转染 CDC6 siRNA 的 SW620 细胞，观察其对 SW620 细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的

影响。结果 永生化结直肠细胞株FHC中CDC6蛋白的相对表达量低于结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29，

差异均有统计学意义（P﹤0.05）。转染 CDC6 siRNA 能够抑制 SW620 细胞增殖，促进细胞凋亡，减少侵袭细胞数

目、迁移细胞数目，降低p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达量，而对JAK2、STAT3蛋白的相对表达量无明显影响。

采用 colivelin 激活 JAK2/STAT3 信号通路可以逆转 CDC6 siRNA 对 SW620 细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。

结论 转染 CDC6 siRNA 可通过下调 JAK2/STAT3 信号通路，抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导细

胞凋亡。

目的 探讨曲古霉素 A（TSA）对人膀胱癌细胞 EJ 增殖及 WNT 抑制因子-1（WIF-1）mRNA 表达的影

响，并分析其可能的作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的TSA对人膀胱癌细胞

EJ增殖的影响；采用流式细胞术检测经TSA处理后人膀胱癌细胞EJ的细胞周期分布情况；采用实时逆转录聚合

酶链反应（RT-PCR）检测用药前后人膀胱癌细胞 EJ 中 WIF-1 mRNA 的表达情况；采用染色质免疫沉淀技术分析

用药前后 WIF-1 基因启动子区组蛋白 H3 第 9 位赖氨酸（H3-K9）的乙酰化状态。结果 MTT 比色法检测结果显

示，处理 72 h 后，0.1、0.2、0.4、0.8 和 1.6 μmol/L 人膀胱癌细胞 EJ 的增殖抑制率均高于空白对照组（P﹤0.05）。流

式细胞仪检测结果显示，人膀胱癌细胞 EJ 经 0.2、0.4 和 0.8 μmol/L 浓度的 TSA 处理 72 h 后，G0/G1期、G2/M 期细胞

的数量随着 TSA 浓度的升高而逐渐增加，S 期细胞的数量随着 TSA 浓度的升高而逐渐减少。RT-PCR 检测结果

显示，与空白对照组相比，不同浓度（0.2、0.4 和 0.8 μmol/L）的 TSA 处理 24、48、72 h 后，人膀胱癌细胞 EJ 中 WIF-1

mRNA的相对表达量均升高（P﹤0.05）。琼脂糖凝胶电泳结果显示，电泳条带符合预期的片段长度，经TSA处理

后，人膀胱癌细胞 EJ 中扩增出目的片段，且随着 TSA 浓度的增加，目的片段的产物增多。结论 TSA 对人膀胱

癌细胞 EJ 的增殖具有抑制作用，其作用机制可能涉及细胞周期阻滞、WIF-1 基因启动子区组蛋白 H3-K9 乙酰化

水平升高及该基因的表达水平升高。

目的 探讨 miRNA-218-5p 对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 将 BIU-78 膀胱癌

细胞分为 miRNA-con 组（转染 miRNA-con）、miRNA-218-5p 组（转染 miRNA-218-5p mimics）、anti-miRNA-con 组 （转染anti-miRNA-con）、anti-miRNA-218-5p组（转染anti-miRNA-218-5p）、si-con组（转染si-con）、si-98序列相似的

家族成员 A（FAM98A）组（转染 si-FAM98A）、miRNA-218-5p+pcDNA-con 组（共转染 miRNA-218-5p 和 pcDNAcon）、miRNA-218-5p+pcDNA-FAM98A 组（共转染 miRNA-218-5p 和 pcDNA-FAM98A）。采用定量逆转录聚合酶

链反应（qRT-PCR）检测 miRNA-218-5p 和 FAM98A mRNA 的表达水平；蛋白质印迹法（Western blot）检测蛋白表

达；MTT 法检测细胞增殖率；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果

相较于正常膀胱组织细胞 SV-HUC-1，膀胱癌细胞 BIU-78、T24、EJ 中 FAM98A mRNA 和蛋白表达水平均升高，

miRNA-218-5p 表达水平均降低（P﹤0.05）。过表达 miRNA-218-5p 和敲减 FAM98A 均可抑制膀胱癌细胞 BIU-78

增殖，诱导细胞凋亡，抑制 cyclin D1、B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）表达，促进 Bcl-2 相关 X 蛋白（BAX）表达。

miRNA-218-5p 靶向负调控 FAM98A 的表达，过表达 FAM98A 能逆转 miRNA-218-5p 对膀胱癌细胞 BIU-78 的增殖

抑制和凋亡促进作用。过表达 miRNA-218-5p 抑制磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）/蛋白激酶 B（AKT）信号通路中

p-PI3Kp85 和 p-AKT 蛋白的表达，过表达 FAM98A 能逆转 miRNA-218-5p 对 p-PI3Kp85 和 p-AKT 表达的抑制作

用。结论 miRNA-218-5p 可抑制膀胱癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，其机制可能与 FAM98A 及 PI3K/AKT 信号通

路有关，将可为膀胱癌的预防和治疗提供新靶点。

目的 分析丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 将SKOV3细胞分为空白对照组（C组）、脂肪乳对照组（F组），以及按不同丙泊酚浓度（25、50、100μmol/L）干预分为P25组、P50组、P100组。CCK8实验检测不同组SKOV3细胞吸光度（OD）值评估细胞增殖活性；划痕实验、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭实验检测不同组SKOV3细胞迁移、凋亡、侵袭活性。细胞免疫荧光法和Western blot法检测各组SKOV3细胞中Yes相关蛋白（YAP）表达情况。结果 各组SKOV3细胞48 h时OD值均高于本组24 h时，72 h时OD值均高于48 h时，差异均有统计学意义（P﹤0.05）;24、48 h时，P50组、P100组SKOV3细胞OD值均低于C组、F组及P25组，P100组SKOV3细胞OD值均低于P50组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。P50组、P100组SKOV3细胞凋亡率均高于C组、F组及P25组，迁移率、侵袭数和迁移数均低于C组、F组及P25组，P100组SKOV3细胞凋亡率高于P50组，迁移率、侵袭数和迁移数均低于P50组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。P50组、P100组SKOV3细胞中YAP荧光强度及相对表达量均低于C组、F组及P25组，P100组SKOV3细胞中YAP荧光强度及相对表达量均低于P50组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论 高浓度丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭有抑制作用，这种作用可能通过下调肿瘤细胞中YAP蛋白实现。

目的 研究p53、增殖细胞核抗原（PCNA）在原发性肝癌中的表达情况及与超声图像特征的关系。方法 选取原发性肝癌患者65例，取其肝癌组织及癌旁组织（距肿瘤﹥3 cm）。比较不同组织中p53、PCNA表达情况，总结原发性肝癌超声图像特征，分析原发性肝癌超声图像特征与p53、PCNA的关系。结果 原发性肝癌组织中PCNA、p53阳性表达率均明显高于癌旁组织，差异均有统计学意义（P﹤0.01）。不同p53、PCNA表达情况的原发性肝癌患者肿瘤数量、边界、均匀性、坏死、转移情况比较，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。不同彩色多普勒超声（CDFI）分型原发性肝癌患者p53、PCNA表达情况比较，差异均有统计学意义（P﹤0.01）；且Ⅲ型患者p53、PCNA阳性表达率均高于Ⅰ型，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。不同三维彩色血管能量成像（3D-CPA）分型原发性肝癌患者p53、PCNA表达情况比较，差异均有统计学意义（P﹤0.01）；且Ⅱ、Ⅲ型患者p53、PCNA阳性表达率均高于Ⅰ型，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论 p53、PCNA与原发性肝癌超声图像特征具有一定关系，有利于原发性肝癌的诊断及治疗。

目的 探讨乏氧条件下组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)对肝癌细胞增殖转移能力的影响。方法 取46例肝癌患者的肝癌组织及相应的癌旁组织，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HDAC6mRNA的相对表达量、免疫组化法检测HDAC6蛋白的表达情况。将转染HDAC6小干扰RNA(siRNA)的乏氧人肝癌HepG2细胞作为Hp-siHDAC6组，未转染的乏氧人肝癌HepG2细胞作为Hp组，将常氧人肝癌HepG2细胞作为NC组。采用定量RT-PCR法检测3组人肝癌HepG2细胞HDAC6 mRNA的相对表达量，采用CCK8法检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果 肝癌患者肝癌组织中HDAC6 mRNA的相对表达量明显低于癌旁组织（P﹤0.01）,HDAC6蛋白阳性表达率为34.78%，明显低于癌旁组织的73.91%(P﹤0.01)。肿瘤直径≥5 cm、术前甲胎蛋白（AFP）水平≥400 ng/ml、分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的肝癌患者肝癌组织中HDAC6阳性表达率分别低于肿瘤直径﹤5 cm、术前AFP水平﹤400 ng/ml、分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。Hp组和Hp-siHDAC6组细胞中HDAC6 mRNA的相对表达量均明显低于NC组（P﹤0.01）,Hp-siHDAC6组细胞中HDAC6 mRNA的相对表达量明显低于Hp组（P﹤0.01）。转染48、72、96 h后，Hp组和Hp-siHDAC6组细胞的光密度（OD）值均明显高于NC组（P﹤0.01）,Hp-siHDAC6组细胞OD值均明显高于Hp组（P﹤0.01）。Hp组和Hp-siHDAC6组细胞迁移数、细胞侵袭数均明显高于NC组（P﹤0.01）,Hp-siHDAC6组细胞迁移数、细胞侵袭数均明显高于Hp组（P﹤0.01）。结论 HDAC6蛋白在肝癌组织中表达下调，与肝癌患者的肿瘤直径、术前AFP水平、分化程度、TNM分期密切相关。乏氧可增强人肝癌HepG2细胞的增殖迁移能力，其机制可能与HDAC6基因的表达下调有关。

目的 探讨ASB16反义RNA1(ASB16-AS1)在鼻咽癌组织中的表达及对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响和作用机制。方法 采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测33例鼻咽癌组织和对应癌旁组织中ASB16-AS1和miRNA-363-5p的表达水平。将鼻咽癌细胞C666-1分为si-NC组、si-ASB16-AS1组、si-ASB16-AS1+antimiRNA-NC组和si-ASB16-AS1+anti-miRNA-363-5p组，分别采用CCK8法、克隆形成实验、流式细胞术检测细胞的增殖率、克隆形成数及凋亡率，采用蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞中Ki-67、cleaved caspase 3、pro-caspase 3蛋白表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证ASB16-AS1和miRNA-363-5p的调控关系。结果 鼻咽癌组织中ASB16-AS1相对表达量明显高于癌旁组织，miRNA-363-5p相对表达量明显低于癌旁组织，差异均有统计学意义（P﹤0.01），且鼻咽癌组织中ASB16-AS1与miRNA-363-5p的表达呈负相关（r=-0.992,P﹤0.05）。siASB16-AS1组C666-1细胞的光密度（OD）值（48、72 h）、克隆形成数、Ki-67、pro-caspase 3蛋白相对表达量均低于si-NC组，细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白相对表达量均高于si-NC组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。ASB16-AS1在C666-1细胞中负调控miRNA-363-5p的表达。si-ASB16-AS1+anti-miRNA-363-5p组C666-1细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白相对表达量均低于si-ASB16-AS1+anti-miRNA-NC组，OD值（48、72 h）、克隆形成数、Ki-67、pro-caspase 3蛋白相对表达量均高于si-ASB16-AS1+anti-miRNA-NC组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论 ASB16-AS1可通过调控miRNA-363-5p促进鼻咽癌细胞增殖，抑制鼻咽癌细胞凋亡。