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2021 年第 5 期 第 19 卷
微小 RNA-218-5p 对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制
单位:十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)1泌尿外科,2皮肤科
关键词:miRNA-218-5p98序列相似的家族成员A磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路膀胱癌增殖凋亡
- 摘要:
- 【摘要】
目的 探讨 miRNA-218-5p 对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 将 BIU-78 膀胱癌
细胞分为 miRNA-con 组(转染 miRNA-con)、miRNA-218-5p 组(转染 miRNA-218-5p mimics)、anti-miRNA-con 组 (转染anti-miRNA-con)、anti-miRNA-218-5p组(转染anti-miRNA-218-5p)、si-con组(转染si-con)、si-98序列相似的
家族成员 A(FAM98A)组(转染 si-FAM98A)、miRNA-218-5p+pcDNA-con 组(共转染 miRNA-218-5p 和 pcDNAcon)、miRNA-218-5p+pcDNA-FAM98A 组(共转染 miRNA-218-5p 和 pcDNA-FAM98A)。采用定量逆转录聚合酶
链反应(qRT-PCR)检测 miRNA-218-5p 和 FAM98A mRNA 的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表
达;MTT 法检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果
相较于正常膀胱组织细胞 SV-HUC-1,膀胱癌细胞 BIU-78、T24、EJ 中 FAM98A mRNA 和蛋白表达水平均升高,
miRNA-218-5p 表达水平均降低(P﹤0.05)。过表达 miRNA-218-5p 和敲减 FAM98A 均可抑制膀胱癌细胞 BIU-78
增殖,诱导细胞凋亡,抑制 cyclin D1、B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达,促进 Bcl-2 相关 X 蛋白(BAX)表达。
miRNA-218-5p 靶向负调控 FAM98A 的表达,过表达 FAM98A 能逆转 miRNA-218-5p 对膀胱癌细胞 BIU-78 的增殖
抑制和凋亡促进作用。过表达 miRNA-218-5p 抑制磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶 B(AKT)信号通路中
p-PI3Kp85 和 p-AKT 蛋白的表达,过表达 FAM98A 能逆转 miRNA-218-5p 对 p-PI3Kp85 和 p-AKT 表达的抑制作
用。结论 miRNA-218-5p 可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与 FAM98A 及 PI3K/AKT 信号通
路有关,将可为膀胱癌的预防和治疗提供新靶点。