2021 年第 5 期 第 19 卷

曲古霉素 A 对人膀胱癌细胞 EJ 增殖的影响及其作用机制

作者：冷俊，周晔，施利琴，张莉

单位：上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院检验科

关键词：曲古霉素A膀胱癌WNT抑制因子1组蛋白乙酰化增殖

• 摘要：
• 【摘要】

  目的 探讨曲古霉素 A（TSA）对人膀胱癌细胞 EJ 增殖及 WNT 抑制因子-1（WIF-1）mRNA 表达的影

  响，并分析其可能的作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的TSA对人膀胱癌细胞

  EJ增殖的影响；采用流式细胞术检测经TSA处理后人膀胱癌细胞EJ的细胞周期分布情况；采用实时逆转录聚合

  酶链反应（RT-PCR）检测用药前后人膀胱癌细胞 EJ 中 WIF-1 mRNA 的表达情况；采用染色质免疫沉淀技术分析

  用药前后 WIF-1 基因启动子区组蛋白 H3 第 9 位赖氨酸（H3-K9）的乙酰化状态。结果 MTT 比色法检测结果显

  示，处理 72 h 后，0.1、0.2、0.4、0.8 和 1.6 μmol/L 人膀胱癌细胞 EJ 的增殖抑制率均高于空白对照组（P﹤0.05）。流

  式细胞仪检测结果显示，人膀胱癌细胞 EJ 经 0.2、0.4 和 0.8 μmol/L 浓度的 TSA 处理 72 h 后，G0/G1期、G2/M 期细胞

  的数量随着 TSA 浓度的升高而逐渐增加，S 期细胞的数量随着 TSA 浓度的升高而逐渐减少。RT-PCR 检测结果

  显示，与空白对照组相比，不同浓度（0.2、0.4 和 0.8 μmol/L）的 TSA 处理 24、48、72 h 后，人膀胱癌细胞 EJ 中 WIF-1

  mRNA的相对表达量均升高（P﹤0.05）。琼脂糖凝胶电泳结果显示，电泳条带符合预期的片段长度，经TSA处理

  后，人膀胱癌细胞 EJ 中扩增出目的片段，且随着 TSA 浓度的增加，目的片段的产物增多。结论 TSA 对人膀胱

  癌细胞 EJ 的增殖具有抑制作用，其作用机制可能涉及细胞周期阻滞、WIF-1 基因启动子区组蛋白 H3-K9 乙酰化

  水平升高及该基因的表达水平升高。