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2021 年第 9 期 第 19 卷
miRNA-186 上调 Dicer1 的表达影响胃癌细胞侵袭和迁移的作用机制研究
作者:李道宏,胡爱侠#,靳钰炜
- 摘要:
- 【摘要】
目的 探讨 miRNA-186 上调 Dicer1 的表达影响胃癌细胞侵袭和迁移的作用机制。方法 取 40 例胃
癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织;将转染 pLVTHM-mimic-miRNA-186 和 pLVTHM-mimic-NC 的慢病毒感染
液分别转染 BGC-823 细胞,得到过表达 BGC-823-mimics-miRNA-186 细胞、阴性对照 BGC-823-mimics-NC 细胞。
定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同组织和细胞中miRNA-186的相对表达量;Transwell小室检测细胞
侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力;间接免疫荧光法(IFA)检测 Dicer1 相关分子神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的阳性表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-186和Dicer1的靶向关系,Western blot检测各细胞
Dicer1 的相对表达量。结果 胃癌组织中 miRNA-186 的相对表达量明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。胃癌细胞
BGC-823 和 BGC-823-mimics-NC 中 miRNA-186 的相对表达量均明显低于正常胃黏膜上皮细胞 RGM-1,且 BGC-
823-mimics-miRNA-186 细胞中 miRNA-186 的相对表达量明显高于胃癌细胞 BGC-823 及 BGC-823-mimics-NC,差
异均有统计学意义(P﹤0.01)。BGC-823-mimics-miRNA-186 细胞侵袭数目少于胃癌细胞 BGC-823 和 BGC-823-
mimics-NC,细胞迁移率低于胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。过表达
miRNA-186 的 BGC-823-mimics-miRNA-186 细胞中 N-cadherin 阳性表达率低于胃癌细胞 BGC-823 和 BGC-823-
mimics-NC(P﹤0.05)。mimics-miRNA-186能明显抑制野生型psi-CHECK-Dicer1-wild的荧光素酶活性,而对突变
型 psi-CHECK-Dicer1-mutant 的荧光素酶活性无明显影响。胃癌细胞 BGC-823 和 BGC-823-mimics-NC 中 Dicer1
蛋白的相对表达量均明显低于正常胃黏膜上皮细胞 RGM-1,且 BGC-823-mimics-miRNA-186 细胞中 Dicer1 的相
对表达量明显高于胃癌细胞 BGC-823 和 BGC-823-mimics-NC,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论 miRNA-
186通过靶向正调控Dicer1的表达,下调N-cadherin的表达可抑制胃癌细胞的侵袭和迁移能力。